【穴位定位】取穴时，可采用正坐或仰卧的姿势，行间穴位于人体的足背侧，大拇趾、二趾合缝后方赤白肉分界处凹陷中，稍微靠大拇趾边缘。
穴位定位所用的“寸”和我们日常的概念不同，而是指的“同身寸”，什么是同身寸？
行间穴功能、定位及按摩方法
【穴位功效】
此穴的主治疾病为：宿醉不适、眼部疾病、腿抽筋、夜尿症、肝脏疾病、腹气上逆、肋间神经痛、月经过多、粘膜炎等。此穴位为人体足厥阴肝经上的主要穴道之一，月经过多，闭经，痛经，白带，阴中痛，遗尿，淋疾，疝气，胸胁满痛，呃逆，咳嗽，洞泻，头痛，眩晕，目赤痛，青盲，中风，癫痫，瘛疭，失眠，口喎，膝肿，下肢内侧痛，足跗肿痛。
【主治病症】
1、心血管系统疾病：心绞痛，心悸，胸闷气短。 外科疾病：疔疮痈肿。
2、神经系统疾病：小儿惊风，精神经分裂症，神经衰弱，脑血管后遗症。
3、泌尿系统疾病：遗尿，淋疾。
4、运动系统疾病：急慢性腰腿痛，膝部扭伤及慢性劳损。
5、生殖系统疾病：睾丸炎，阴茎痛，疝气，功能性子宫出血，痛经。
6、呼吸系统疾病：咳嗽气喘，齿痛喉痹。
7、消化系统疾病：消化不良，便秘，胃脘胀痛，呃逆腹胀。
8、其他疾病：高血压，青光眼，肋间神经痛，腹膜炎，糖尿病，牙痛，失眠及足跟痛。【人体穴位配伍】 配睛明穴治青光眼、降眼压；配太冲穴、合谷穴、、风池穴、百会穴治肝火上炎、头痛、眩晕、衄血；配中脘穴、肝俞穴、胃俞穴治肝气犯胃之胃痛；配中府穴、孔最穴治肝火犯肺干咳或咯血。
【解剖】
穴下为皮肤、皮下组织、骨间背侧肌。皮肤由腓深神经终末支的内侧支分布。趾蹼外足背与足底的皮肤和皮下筋膜互相移行。针由皮肤、皮下筋穿足背深筋膜，在拇长、短伸肌腱 的外侧，穿经腓深神经的末支(或经其内、外侧;第一跖骨动脉行于该神经的外侧，跖背、趾背动脉均有穿支和跖底、趾底动脉吻合)，继入第一骨间背侧肌。该肌由足底外侧神经的深支支配。
【名解】
(1)行间。行，行走、流动、离开也。间，二者当中也。该穴名意指肝经的水湿风气由此顺传而上。本穴物质为大敦穴传来的湿重水气，至本穴后吸热并循肝经向上传输，气血物质遵循其应有的道路而行，故名。
(2)肝经荥穴。荥，极小的水流也。本穴物质为大敦穴传来的滞重水气，至本穴后，水湿冷降而成为地部经水，水量极小，故为肝经荥穴。
(3)本穴属火。属火，指本穴气血运行变化表现出的五行属性。本穴物质为大敦穴传来的滞重水气，至本穴后，大部分滞重水湿冷降归地而不能成为肝经的上行气血，只有小部分水湿吸热胀散而上行，此部分气血表现出火的炎上特征，故其属火。
【气血特征】气血物质为天之下部的湿热水气。
【运行规律】一是吸热后上炎天部，二是循肝经传至太冲穴。
【功能作用】生风化火。
【治法】寒则点刺出血或补之灸之，热则泻针出气。
【刺灸法按摩法】
刺法：1、直刺0.5-0.8寸，局部酸胀，可放散至足背。2、斜刺0.5-0.8寸，局部酸胀，可放散至足背部。
灸法：直接灸3-5壮，艾条灸5-10分钟。
按摩：用大拇指指尖掐。
【临床运用】
现代常用于治疗高血压、青光眼、结膜炎、睾丸炎、功能性子宫出血、肋间神经痛等。配耳尖、太阳主治目赤肿痛。
治疗因肝气郁结引起的疾病：配合太冲穴，由太冲穴向行间穴方向掐揉。
【扁平疣】
主穴 合谷 曲池 血海 “母疣”(指最先长出或体积最大者) 阿是穴
配穴 肝郁化火者，配太冲、行间、侠溪;风热搏结者，配风池、商阳。
方义 本证刺法以刺疣体局部为主，用粗针刺出血再按压止血，意在破坏疣底部供应疣体的营养血管，使之出血、阻塞，断绝疣体的血液供应，从而使疣体枯萎脱落。因本证为风热毒邪结聚于皮肤所致，故疣数较多者取合谷、曲池针而泻之，散风清热；针泻血海凉血化瘀、软坚散结，更有助于疣体脱落。
【目赤肿痛】
主穴 攒竹 合谷 太冲 太阳 风池
配穴 外感风热者，配少商；肝胆火盛者，配行间、侠溪；阴虚火燥者，配太溪、少府、养老穴
方义 目为肝窍，阳明、少阳、太阳的经脉均循行于目系。攒竹为足太阳经腧穴，能宣泄患部之郁热，有通络明目作用，配合经外奇穴太阳点刺出血以泄热止痛明目；合谷调阳明经气以疏散风热；太冲为足厥阴之原穴，可降肝火以明目；风池为手足少阳与阳维脉之交会穴，疏风消肿，与太冲分属肝胆两经，上下相应，到肝胆之火下行。